이동상에 액체를 쓰는 액체 크로마토그래프의 일종으로 고압 LC(high pressure LC), 고성능 LC 등으로 말하는 경우도 있다.

보통 HPLC로 불리며 액-액, 액-고, 이온교환, 겔 침투 크로마토그래피 4종류로 분류할 수 있다.

이동상은 펌프에 의해 공급되며 맥류가 생기지 않도록 하는 기술이 필요하다.

시료 도입부에도 여러 가지 방식이 있어 주사기에 의한 주입법, 밸브나 루프 등을 이용하는 방법 등이 있다.

물질의 분리는 분리, 목적 성분의 분리에 적당한 충전제를 채운 컬럼(보통 스테인레스 스틸제)이 필요하다.

컬럼의 크기는 분석 목적에 따라 모세관형으로부터 통모양의 것까지 있고 특히 분취용에는 구경이나 길이가 상당히 큰 것까지 쓰이고 있다.

검출부에는 여러 가지방식으로 이용할 수 있지만, 일반적으로 널리 이용되고 있는 것은 UV 검출기, RI 검출기 등이다.

이들의 검출기에는 보통 노이지(noise)나 드리프트(drift)가 적어지도록 내용적이 작은 flow cell이 쓰이고 있다.

검출된 결과는 기록계에 의해 기록되고, 그 결과 크로마토그램이 얻어진다.

최근은 파형 처리 등을 포함시킨 각 종의 기능을 갖는 데이터 처리 장치가 널리 일반적으로 사용되고 있다.

실제로 분석을 하는 경우에 가장 중요시 되는 것은 분리와 검출에 관한 부분이다.

이 때 용매, 시료와 컬럼 충전제와의 관계에 의해 분리가 결정되며 분리된 물질의 검출에도 분리목적물의 특성에 맞는 검출기를 사용한다.

또 용리의 방법에는 대체로 3종류 있다.

일정조성의 용리액만을 쓰는 등용매(isocratic) 용리, 조성을 바꿔 용리액의 용출력을 단계적으로 바꾸는 단계(stepwise) 용리, 연속적으로 바꾸는 경사(gradient) 용리의 3가지이다.

이들을 여러 가지로 조합하여 용리하는 것도 가능하다.

일반적으로 다성분의 동시분석에는 경사 용리법이 유효하지만 되풀이하여 분석을 하는 경우에는 초기 조건에 되돌릴 때까지 상당한 시간을 요하는 결점이 있다.

비교적 유사한 다수 시료의 일상적인 분석에는 단일 용매에 의한 등용매 용리가 가장 편리하다.

현재는 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC: High Performance Liquid Chromatography) 시스템이 입반화되었으며, 10,000psi 이상의 고압을 지원하는 초고성능 액체 크로마토그래피(UPLC: Ultra Performance Liquid Chromatography)도 개발되어 사용되고 있다.

그러나, 현재 많은 양의 시료에 대한 빠른 분석을 요구하는 제약, 생동성실험관련분야를 제외한 일반적인 실험조건에서는 아직 HPLC 시스템이 범용적으로 사용되며, 그 이유는 UPLC 의 빠른 분석능력에도 불구하고, 컬럼의 손상 및 HPLC 시스템으로 대부분의 분리 분석 시험이 가능하기 때문이다.